1、作用不同

手動變速箱油和自動變速箱油都具有對行星齒輪組起到潤滑、散熱、清潔的作用，但自動變速箱油還具有作為液壓傳動的媒介的作用，這一點是手動變速箱油所不具有的。

2、性質不同

由于作用不同，手動變速箱油和自動變速箱油黏度有明顯差異，手動變速箱油較為黏稠，自動變速箱油的主要作用是起到液壓傳動，因此流動性非常好，抗泡性能和空氣釋放性能也比手動變速箱油的要求更嚴。

3、顏色差別

手動變速箱油大部分是淺黃色（新油），使用之后顏色逐漸變深變黑。自動變速箱油大部分是鮮紅色（也有少數是淺黃色），使用后顏色逐漸變深，變成暗紅色、紅褐色。

4、換法不同

手動變速箱油的更換一般是采用的重力換油的方法；自動變速箱油更換則大多用的是循環機換油的方法。